métodos microbiológicos para estudo de água, solo e ar

Microrganismos – criaturas minúsculas, principalmente unicelulares, que são amplamente distribuídos na natureza. Eles são encontrados em todos os meios (ar, solo, água) em humanos e animais, nas plantas.

diversidade qualitativa e número de organismos depender principalmente de compostos nutricionais. Mas também é importante como umidade, temperatura, aeração e ação da luz solar e outros fatores.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Métodos para meios naturais sanitária e estudos microbiológicos pode detectar a presença de agentes patogénicos e para determinar a sua quantidade, em conformidade com os resultados obtidos, para tomar medidas para remover ou evitar doenças infecciosas. Além disso, conta quantitativa é necessária para a modelagem de ecossistema eo desenvolvimento dos processos naturais de governança. . Vamos considerar ainda quais são os métodos de exame microbiológico.

solo

É considerado pelos estudiosos como uma das possíveis vias de transmissão de patologias infecciosas. Com secreções paciente humano ou animal em agentes patogénicos do solo penetrante. Alguns deles, em particular, esporos, podem persistir no solo por um longo tempo (às vezes por décadas). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Os agentes patogénicos incluem solo tais infecções perigosas tais como tétano, antraz, botulismo, e assim por diante. Métodos de estudo sanitário-microbiológica do solo permitem definir "contagem microbiana" (o número de microorganismos no solo de um grama), e índice de E. coli (o número de E. coli) .

análise do solo: uma visão geral

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Métodos para exame microbiológico do solo deve ser atribuído principalmente microscopia direta e cultura sobre sólidos meio nutriente. Populações de microorganismos e seus grupos que habitam o solo, diferem no estatuto taxonómico e funções ecológicas. Na ciência, eles estão unidos sob o termo genérico "biota do solo." Primer – habitat grande número de microorganismos. Em grama de solo está presente desde 1-10000000000 das suas células. Neste ambiente, leva ativamente decomposição de matéria orgânica, com a participação de vários microorganismos saprófitas.

O estudo microscópico método microbiológico: os passos

Análise do meio começa com amostragem. Para este efeito, previamente descascadas e álcool ralado faca (pá pode ser utilizado). Depois disso, a preparação da amostra. O próximo passo – contar as células esfregaços corados. Considere cada etapa separadamente.

amostragem

Na análise de solos agrícolas tendem amostra tomada a partir de uma profundidade de toda a camada. Em primeiro lugar removido 2-3 cm acima do chão, uma vez que podem estar presentes em uma microflora estranha. Em seguida, com uma área de terreno estudado tomar monolitos. O comprimento de cada um deles deve estar de acordo com a espessura da camada a partir do qual você quer provar.

Em um terreno de 100-200 sq. 7-10 m amostras seleccionadas. O peso de cada – da ordem de 0,5 kg. As amostras devem ser misturados completamente no saco. Em seguida, tomar a amostra médio pesando aproximadamente 1 kg. Ele deve ser colocado em pergaminho embalagem (esterilizada) fechado num saco de pano. Antes da análise da amostra armazenado na geladeira dirigir.

Preparação pesquisa

O solo agitada vertida em vidro seco. Sua pré-limpeza com álcool e queimar acima do queimador. Com uma espátula de solo bem misturada e uniformemente expandidos. É obrigatório para remover as raízes e outros elementos estrangeiros. Para fazer isso, use uma pinça. Antes de pinças de operação e espátula acima do queimador inflamado e deixada arrefecer.

Das várias parcelas de solo distribuídos sobre o vidro, seleccionado pequenas porções. Eles pesaram em um prato de porcelana em uma escala técnica. является специальная обработка образца. método microscópico passo obrigatório de estudos microbiológicos é o processamento especial da amostra. 2 deve ser preparados com antecedência, frasco estéril. O seu tamanho não deve exceder 250 ml. Um dos frascos é vertida em 100 ml de água da torneira. Porque leva 0,4-0,8 ml da amostra de líquido de solo e humedecido com uma pasta. A mistura deve ser esfregada com um dedo ou de borracha pilão durante 5 minutos.

Água a partir do primeiro balão foi transferido para massa de solo balão vazio. Além disso, esfregando suas costas. Após essa massa é transferido para um frasco de perto a chama do queimador. Recipiente com suspensão do solo foi agitada num agitador durante 5 min. Em seguida, foi deixada a assentar durante cerca de 30 segundos. Isto é necessário, a fim de permitir que as grandes partículas de resolver. Após meia uma massa minutos é utilizado para preparar a preparação.

As contagens celulares em esfregaços fixos

, разработанному Виноградским. estudo microscópico directo do solo é realizada pelo método de estudos microbiológicos, desenvolvido Vinogradskii. Em certo volume da suspensão foi contado o número de células de microrganismos. Estudando esfregaços fixos pode armazenar fármacos a longo termo e executar cálculos, a qualquer momento.

Preparação da droga como se segue. Uma certa quantidade de lama (tipicamente de 0,02-0,05 ml) é aplicado com uma micropipeta sobre a lâmina. A esta solução foi adicionada uma gota de agar-agar (polissacarídeo agaropectina mistura de agarose e extraído de algas castanhas e vermelhas do Mar Negro), agitou-se rapidamente e espalhada por uma área 4-6 sq. cm. Pap secas ao ar e fixadas durante 20-30 minutos. álcool (96%). Em seguida, a droga humedecido com água destilada e colocou-se o p-p carbólico eritrosina 20-30 min.

Após a coloração, que é lavado e seco ao ar. As contagens de células realizadas a partir da lente de imersão.

Semeando em meios sólidos

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. métodos microscópicos para exame microbiológico pode detectar um grande número de microorganismos. Mas, apesar disso, o método de inoculação é o mais comum na prática. A sua essência consiste em semear quantidade da droga (suspensão de solo) numa placa de Petri sobre um meio sólido.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Este método de pesquisa microbiológica leva em conta não apenas a quantidade, mas também o grupo e, em alguns casos, e a composição de espécies da flora microscópicas. Contando o número de colónias produzidas, normalmente a partir do fundo da placa de Petri em luz transmitida. Na área calculada colocado um marcador de tinta ou de pontos.

Análise de água

A microflora do corpo de água, como regra geral, reflete a composição microbiana do solo em torno dele. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Neste contexto, os métodos de análise sanitária-microbiológica da água e do solo são de particular importância prática no estudo do estado de um determinado ecossistema. A água fresca contém, como regra geral, cocos, as bactérias em forma de bastonete.

Anaeróbios em água encontrada em pequenas quantidades. Como regra, eles se multiplicam na parte inferior dos corpos de água, na lama, participando no processo de purificação. oceanos microflora e mares vantajosamente representado bactérias halofíticas (halofílicas).

Na água, poços artesiano são praticamente não há microrganismos. Isto é devido à capacidade de filtragem da camada de solo.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Os métodos convencionais de investigação microbiológica da água considerada a definição de índice se-microbiana e coli-titulação ou. O primeiro indicador define o número de bactérias em 1 ml de líquido. coli índice representa o número de coliformes presentes em um litro de água, e se tulo de – o número mínimo ou máximo de líquido de diluição na qual eles podem ainda ser detectadas.

Determinação do número microbiano

Este método sanitária exame microbiológico das águas é como se segue. Em 1 ml de água é determinado número de anaeróbios facultativos e mesofílicas (intermediário) aeróbios capaz de carne em peptona-agar (meio primário) a 37 ° C. durante o dia de modo a formar colónias visíveis a uma ampliação de 2-5 p. ou a olho nu.

является посев. O passo chave do método de análise microbiológica da água é semeada. Uma vez que cada amostra é semeada, pelo menos, 2 volumes diferentes. Quando a análise de água da torneira em cada copo é feito de 1-0.1 ml de líquido puro e contaminado 0.01-0.001 ml. Para a inoculação de 0,1 ml ou menor volume de fluido é diluída com água destilada (estéril). Consistentemente preparar diluições decimais. 1 ml de cada um deles é feito em duas placas de petri.

Breeding preenchido com agar nutriente. Ele deve primeiro derreter, e legal para 45 graus. Depois de se agitar, a forma activa é deixada sobre uma superfície horizontal para a solidificação. A 37 graus. culturas são cultivadas durante todo o dia. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. O método considerado de pesquisa microbiológica da água leva em conta os resultados desses pratos onde o número de colônias na faixa de 30 a 300.

ar

É considerado um terreno de trânsito para os microorganismos. являются седиментация (оседание) и аспирация. Os principais métodos de estudos microbiológicos são sedimentação ar (decantação) e aspiração.

ambiente ar microflora é arbitrariamente dividido em variável e constante. O primeiro grupo inclui levedura, cocos cromogénico, de esporos de Bacillus coli e outros microorganismos que são resistentes a secagem, a exposição à luz. Representantes da microflora variável, que penetram no ar de seu habitat normal, longa mantêm a sua vitalidade.

No ar das grandes cidades microorganismos muito mais do que no ambiente de ar das zonas rurais. Ao longo dos mares, florestas são muito poucas bactérias. purificação do ar facilitar a precipitação: neve e chuva. micróbios Interior muito mais do que em espaços abertos. O seu número é maior no inverno, na ausência de ventilação regular.

sedimentação

считается простейшим. Este método de pesquisa microbiológica em microbiologia é considerado o mais simples. Baseia-se na sedimentação das gotículas e partículas na superfície do agar numa placa de Petri aberta por acção da gravidade. método de sedimentação não pode determinar com precisão o número de bactérias no ar. O facto é que, em um copo aberto para apanhar a fracção fina das partículas de pó e as gotas de origem bacteriana bastante difícil. Na superfície retido principalmente partículas grandes.

Este método não é utilizado para a análise do ar. Este meio ambiente caracterizado por grandes flutuações na velocidade do fluxo de ar. A sedimentação pode, no entanto, ser utilizada na ausência de dispositivos mais sofisticados ou fonte de energia eléctrica.

Determinação do número de microbiana realizada pelo método Omelyansky. De acordo com isto, durante 5 minutos, sobre uma área de superfície de 100 ágar quadrado. cm se instala uma série de bactérias está presente em 10 litros de ar.

Encomendar 535 "Sobre a unificação de métodos microbiológicos de investigação"

análise bacteriológica ocupa um lugar importante nas actividades complexas clínicos e laboratoriais que visam o diagnóstico, prevenção e tratamento de várias doenças infecciosas. No entanto, o estudo do ambiente, eles não são limitados.

De particular importância é a análise bacteriológica do material biológico em hospitais. Para a pesquisa realizada nas unidades de saúde, aumento requisitos. O propósito da Ordem "On a unificação de métodos microbiológicos de investigação" é melhorar a análise bacteriológica, melhorar a qualidade e eficiência dos diagnósticos microbiológicos.

O exame microscópico de esfregaços em mulheres

É um método fundamental de análise para o diagnóstico de infecções, infecções sexualmente transmissíveis e infecções oportunistas (bactérias oportunistas).

A análise microscópica para avaliar a composição qualitativa e quantitativa da microflora, verificar a correcção de amostragem. Por exemplo, a presença do epitélio vaginal em amostras de tecidos do canal cervical indica uma violação das regras de selecção de uma amostra biológica.

Diz-se que o exame microbiológico, neste caso, é geralmente seguido por alguns problemas. Eles estão relacionados ao fato de que no trato genital inferior é normalmente apresentam uma microflora diversificada que varia em diferentes idades. Para melhorar a eficácia da investigação e desenvolveram regras padronizadas.

Diagnóstico de infecções virais

É levada a cabo através de métodos de detecção de ARN e de ADN patógenos. Eles baseiam-se essencialmente na determinação de sequências de nucleótidos em material patológico. Para esta finalidade, as sondas moleculares. Eles são produzidos artificialmente ácidos nucleicos complementares a (complementar a) os ácidos virais marcadas com um marcador radioactivo ou biotina.

A peculiaridade do método é repetida copiar o fragmento de ADN específico contendo algumas centenas de (ou dezenas de pares de nucleótidos). replicação (cópia) é que extensão pode começar apenas em algumas unidades. iniciadores (primers) utilizados para criá-las. Eles são oligonucleotídeos sintetizados.

PCR de diagnóstico (reacção em cadeia da polimerase) é simples em execução. Este método permite-lhe obter rapidamente o resultado usando uma pequena quantidade de material patológico. Usando PCR diagnóstico identifica infecções latentes (ocultos) aguda, crónica e.

Quando a sensibilidade deste método é considerado mais preferível. No entanto, os sistemas de testes atuais não são confiáveis o suficiente, então o diagnóstico PCR não pode substituir completamente os métodos tradicionais.